Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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caspase-7 Plasmide Double Nickase (h): sc-401301-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- caspase-7 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il caspase-7 Double Nickase Plasmid (h) e il caspase-7 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CASP7. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: caspase-7 p10 Antibody (B-3): sc-365034
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
caspase-7 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401301-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
caspase-7 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401301-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CASP7 codifica la caspasi-7, una proteasi esecutrice cisteina-aspartato che viene attivata a valle delle caspasi iniziatrici durante la segnalazione apoptotica intrinseca ed estrinseca. Una volta processata, la caspasi-7 scinde un ampio insieme di substrati per promuovere la condensazione della cromatina, il rimodellamento del citoscheletro e lo smantellamento ordinato della cellula, agendo in sinergia con la caspasi-3. L’attività di CASP7 si interfaccia con le risposte allo stress mitocondriale, le vie dei recettori di morte e contesti infiammatori in cui la proteolisi apoptotica contribuisce all’omeostasi tissutale. Una segnalazione deregolata della caspasi-7 è stata associata a soglie di morte cellulare alterate osservate in ambito oncologico, nelle neurodegenerazioni e nelle patologie immuno-correlate, rendendola un nodo utile per studi meccanicistici dell’apoptosi.
caspase-7 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CASP7 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CASP7. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CASP7. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CASP7 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.