caspase-5 Plasmide Double Nickase (h): sc-401520-NIC

CASP5 codifica la caspasi-5, una caspasi infiammatoria che contribuisce alla segnalazione dell’immunità innata promuovendo la maturazione proteolitica di citochine pro-infiammatorie e l’esecuzione della morte cellulare piroptotica. Agisce all’interno di vie collegate all’inflammasoma e partecipa al riconoscimento e alla risposta a prodotti microbici e allo stress cellulare, influenzando programmi infiammatori epiteliali e mieloidi. Un’attività deregolata della caspasi-5 è stata associata a un rilascio anomalo di citochine e a danno tissutale infiammatorio, rendendo CASP5 un nodo utile per studiare l’omeostasi immunitaria e le reti di segnalazione infiammatoria. L’indagine di CASP5 supporta ricerche meccanicistiche sull’attivazione dell’inflammasoma, sull’elaborazione delle citochine e sul “cross-talk” tra vie di morte cellulare.

caspase-5 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CASP5 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CASP5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CASP5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CASP5 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.