Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) CAR: sc-419887-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)CAR consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CAR (m) y el plásmido de doble nickasa CAR (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Cxadr. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CAR Anticuerpo (E-1): sc-373791
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) CAR | sc-419887-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) CAR | sc-419887-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Cxadr codifica el receptor de coxsackievirus y adenovirus (CAR), una molécula de adhesión celular de la superfamilia de las inmunoglobulinas concentrada en las uniones estrechas de epitelios y endotelios. CAR contribuye a la adhesión intercelular, a la polaridad ápico–basolateral y a la organización de las uniones mediante interacciones con proteínas andamiaje y reguladores del citoesqueleto, vinculándolo con vías que gobiernan la integridad de la barrera y la morfogénesis tisular. En modelos murinos, la expresión o localización alteradas de CAR se estudian en el contexto de la biología de entrada viral, el desarrollo y la conducción cardíacos, y la homeostasis epitelial, lo que convierte a Cxadr en un nodo útil para investigar las interacciones huésped–patógeno y la señalización dependiente de uniones.
CAR El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Cxadr en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Cxadr. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Cxadr. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Cxadr alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.