Plasmide CRISPR/Cas9 KO CaMKV (m): sc-433479
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CaMKV Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CaMKV, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CaMKV Antibody (2F3-1A2): sc-517082
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CaMKV (m) | sc-433479 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Camkv code pour CaMKV, une protéine de type kinase dépendante de la calmoduline atypique, enrichie dans les neurones et impliquée dans la signalisation dépendante de l’activité. Bien qu’il ait été rapporté que son activité catalytique est limitée ou atypique par rapport aux CaMK canoniques, CaMKV participe à des réseaux de régulation liés au Ca2+/calmoduline qui influencent la signalisation synaptique, l’organisation du cytosquelette et la différenciation neuronale. Par ces processus, Camkv a été associé à des voies contrôlant la croissance des neurites et la plasticité, ce qui le rend pertinent pour des études mécanistiques du développement et des dysfonctionnements du système nerveux. Une régulation altérée de nœuds de signalisation sensibles au Ca2+, tels que CaMKV, est fréquemment étudiée dans le contexte de phénotypes neurodéveloppementaux et neuropsychiatriques dans des systèmes modèles.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CaMKV (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Camkv dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Camkv, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Camkv à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CaMKV.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Camkv pour l'étude de la signalisation de CaMKV, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Camkv essentiels à la fonction de CaMKV
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Camkv pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CaMKV plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le CaMKV plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Camkv. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CaMKV plasmide HDR (m) et le CaMKV (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Camkv pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Camkv définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.