Calponin 2 Plasmide Double Nickase (h): sc-402882-NIC

Il gene umano **CNN2** codifica la **calponina 2**, una proteina regolatoria legante l’actina che modula l’organizzazione del citoscheletro, la contrattilità e la forma cellulare influenzando le interazioni actomiosiniche nelle cellule muscolari lisce e nelle cellule non muscolari. La calponina 2 contribuisce a processi quali adesione cellulare, migrazione e meccanotrasduzione, collegando la dinamica dell’actina a reti di segnalazione come le vie dipendenti dalle GTPasi Rho. Un’alterata espressione di **CNN2** o il rimodellamento del citoscheletro mediato dalla calponina sono stati studiati in contesti di rimodellamento vascolare, motilità cellulare associata all’infiammazione e invasione delle cellule tumorali, in cui la regolazione dell’actina può influenzare l’architettura dei tessuti e il comportamento cellulare. Queste caratteristiche rendono **CNN2** un bersaglio utile per studiare il controllo citoscheletrico della meccanica cellulare e dei fenotipi responsivi allo stress.

Calponin 2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CNN2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CNN2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CNN2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CNN2 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.