C6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419396
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- C6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico C6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:C6 Anticorpo (3G11): sc-66191
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
C6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419396 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O C6 murino codifica o componente do complemento C6, uma proteína da via terminal necessária para a montagem do complexo de ataque à membrana (MAC, C5b-9), que forma poros líticos em membranas-alvo. Após a ativação do complemento pelas vias clássica, das lectinas ou alternativa, o C6 liga-se ao C5b e inicia o recrutamento de C7, C8 e C9, conectando a opsonização e a sinalização inflamatória ao dano direto de membrana. A atividade do C6 influencia a vigilância imune inata, as interações hospedeiro–patógeno e a regulação de microambientes inflamatórios. A atividade desregulada do complemento terminal tem sido associada a lesão tecidual inflamatória e imunomediada, tornando o C6 um alvo útil para estudos mecanísticos de patologias impulsionadas pelo complemento.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO C6 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene C6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do C6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do C6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína C6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de C6 para a investigação da sinalização de C6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) C6 críticos para a função C6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos C6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo C6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo C6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus C6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo C6 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR C6 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia C6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo C6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.