C20orf111 Plasmide Double Nickase (h): sc-412210-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- C20orf111 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il C20orf111 Double Nickase Plasmid (h) e il C20orf111 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira OSER1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
C20orf111 Plasmide Double Nickase (h) | sc-412210-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
C20orf111 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-412210-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
OSER1 (proteina C20orf111) è un fattore umano associato al reticolo endoplasmatico, implicato nell’organizzazione dell’architettura delle membrane del RE e nel supporto dell’omeostasi della via secretoria. Tra i ruoli cellulari riportati per OSER1 figurano contributi alla morfologia del RE, alla gestione delle proteine nel sistema secretorio precoce e al coordinamento di processi di adattamento allo stress che interagiscono con le reti della proteostasi. L’alterazione della struttura del RE e una segnalazione cronica dello stress del RE sono ampiamente rilevanti per il rimodellamento oncogeno e per i meccanismi neurodegenerativi, rendendo OSER1 un nodo utile per studiare come l’organizzazione delle membrane influenzi lo stato cellulare. L’espressione di OSER1 e il contesto delle sue vie di segnalazione sono stati esplorati in relazione a fenotipi di proliferazione e di risposta allo stress, a supporto della sua inclusione in studi di genomica funzionale sul rimodellamento cellulare associato alle malattie.
C20orf111 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus OSER1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di OSER1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di OSER1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con OSER1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.