c-Mpl CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403035

개요

MPL은 혈소판생성호르몬(thrombopoietin) 수용체인 c-Mpl을 암호화하며, c-Mpl은 주로 조혈줄기/전구세포와 거핵구 계통에서 발현되는 I형 사이토카인 수용체로서 자기재생, 생존, 그리고 혈소판 생성 조절에 관여한다. 리간드가 결합하면 JAK2 의존적 신호전달이 활성화되고, 하위의 STAT, PI3K/AKT, MAPK/ERK 경로가 함께 작동하여 골수 미세환경에서의 증식 및 분화 프로그램을 조율한다. MPL 신호전달의 조절 이상과 수용체 기능 변화는 비정상적인 거핵구 생성과 골수계 질환의 병태생리와 연관되며, 비정상적인 사이토카인 반응성과 줄기세포 항상성 교란과 연결된 표현형을 포함한다. 계통 제한적으로 발현되면서 경로 출력이 잘 규정된 수용체인 c-Mpl은 사이토카인 신호전달, 조혈 운명 결정, 그리고 수용체 매개 피드백 조절을 분석하기에 다루기 쉬운 핵심 노드로 활용된다.

c-Mpl CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 MPL 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 MPL 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 MPL의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 c-Mpl 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 c-Mpl 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 MPL 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• c-Mpl 기능에 중요한 MPL 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 MPL 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• c-Mpl CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 c-Mpl CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 MPL 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  c-Mpl HDR 플라스미드 (h) 및 c-Mpl HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 MPL 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 MPL 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.