c-Maf Plasmide Double Nickase (h): sc-410543-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- c-Maf Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il c-Maf Double Nickase Plasmid (h) e il c-Maf Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MAF. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: c-Maf Antibody (6B8): sc-293420
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
c-Maf Plasmide Double Nickase (h) | sc-410543-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
c-Maf Plasmide Double Nickase (h2) | sc-410543-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAF codifica il fattore di trascrizione c-Maf, una proteina con motivo bZIP (basic leucine zipper) che si lega agli elementi di riconoscimento Maf per regolare le decisioni sul destino cellulare e programmi di differenziamento specifici di tessuto. c-Maf integra segnali provenienti da citochine e da vie di sviluppo, plasmando reti trascrizionali che influenzano proliferazione, risposte allo stress e polarizzazione delle cellule immunitarie, includendo ruoli nella differenziazione delle cellule T helper e nella funzione dei macrofagi. Un’attività deregolata di MAF/c-Maf è stata associata a programmi trascrizionali oncogenici e ad alterazioni della regolazione immunitaria, ed è anche implicata nei processi di sviluppo dell’occhio e del sistema nervoso. Queste proprietà rendono c-Maf un nodo utile per analizzare il controllo trascrizionale della specificazione di linea, l’adattamento metabolico e l’espressione genica dipendente dal contesto in sistemi modello umani.
c-Maf Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MAF nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MAF. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MAF. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MAF interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.