c-Maf Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h2): sc-410543-KO-2

Panoramica

MAF codifica c-Maf, un fattore di trascrizione della famiglia basic leucine zipper (bZIP) che si lega agli elementi di riconoscimento Maf per regolare programmi di espressione genica dipendenti dal contesto. Nelle cellule umane, c-Maf integra i segnali di differenziamento e di risposta allo stress, influenzando la specificazione di linea, la trascrizione di geni di citochine e della matrice extracellulare, nonché il coordinamento delle vie del ciclo cellulare e della sopravvivenza. L’attività di c-Maf interagisce con le reti di segnalazione immunitaria e con i circuiti trascrizionali dello sviluppo, modellando gli stati funzionali di macrofagi e linfociti T, oltre all’omeostasi dei tessuti. Un’espressione deregolata di MAF o un’alterazione dell’output trascrizionale di c-Maf è associata a differenziamento anomalo e a fenotipi proliferativi osservati in molteplici contesti di ricerca rilevanti per la patologia, inclusi modelli di neoplasie ematologiche e studi di biologia dell’infiammazione.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO c-Maf (h2) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene MAF in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del MAF insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto MAF a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina c-Maf.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di MAF per lo studio della segnalazione di c-Maf, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni MAF critici per la funzione di c-Maf
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di MAF per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal c-Maf CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal c-Maf CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus MAF. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal c-Maf Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR c-Maf (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia MAF per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio MAF definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.