c-IAP2 Plasmide Double Nickase (h): sc-400762-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- c-IAP2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il c-IAP2 Double Nickase Plasmid (h) e il c-IAP2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira BIRC3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: c-IAP2 Antibody (Ac-71): sc-517317
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
c-IAP2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400762-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
c-IAP2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400762-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BIRC3 codifica l’inibitore cellulare umano dell’apoptosi 2 (c-IAP2), una ligasi E3 dell’ubiquitina che regola la segnalazione della superfamiglia dei recettori del TNF ubiquitinando RIPK1 e adattatori correlati, modulando così l’attivazione di NF-κB, le risposte infiammatorie e le decisioni di morte cellulare. Attraverso i suoi domini BIR e il dominio RING finger, c-IAP2 integra un controllo dipendente dall’ubiquitina di apoptosi e necroptosi, plasmando l’attività delle caspasi e i segnali di sopravvivenza in risposta a citochine e stress. Una funzione o un’espressione deregolata di BIRC3 è associata ad alterazioni della segnalazione immunitaria e a resistenza all’apoptosi, e perturbazioni ricorrenti di queste vie sono riportate in neoplasie ematologiche e in altri tumori. In quanto nodo nelle reti ubiquitina–proteasoma e TNF/NF-κB, BIRC3 è spesso oggetto di studio nelle ricerche sulla segnalazione infiammatoria, sui checkpoint di sopravvivenza cellulare e sul rimodellamento delle vie mediato dall’ubiquitina.
c-IAP2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus BIRC3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di BIRC3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di BIRC3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con BIRC3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.