Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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BUBR1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403807-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BUBR1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BUBR1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase BUBR1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BUB1B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BUBR1 Anticorpo (8G1): sc-47744
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BUBR1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403807-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BUBR1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403807-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BUB1B codifica a BUBR1, um componente central do checkpoint de montagem do fuso, que monitora a ligação cinetócoro–microtúbulo e restringe a atividade do APC/C por meio do complexo de checkpoint mitótico, para evitar o início prematuro da anáfase. Ao regular o alinhamento dos cromossomos, a coesão entre cromátides-irmãs e a progressão da anáfase, a BUBR1 ajuda a manter a estabilidade do genoma e limita a aneuploidia decorrente da segregação cromossômica incorreta. A desregulação de BUB1B/BUBR1 tem sido associada a fenótipos de instabilidade cromossômica e foi estudada no contexto de distúrbios do crescimento e desenvolvimento e de defeitos do checkpoint mitótico relacionados ao câncer. Como resultado, a BUBR1 é amplamente utilizada como um ponto de partida molecular para dissecar redes de controle mitótico e a sinalização no cinetócoro em células humanas.
BUBR1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BUB1B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BUB1B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BUB1B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BUB1B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.