BRD9 Plasmide Double Nickase (m): sc-430581-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BRD9 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il BRD9 Double Nickase Plasmid (m) e il BRD9 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Brd9. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BRD9 Plasmide Double Nickase (m) | sc-430581-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BRD9 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-430581-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Brd9** codifica **BRD9**, una proteina contenente un bromodominio che riconosce i segni di acetilazione della lisina e funge da subunità centrale del complesso di rimodellamento della cromatina BAF non canonico (ncBAF/GBAF). Accoppiando il riconoscimento dell’acetilazione degli istoni al riposizionamento dei nucleosomi dipendente da ATP, BRD9 contribuisce a regolare l’accessibilità di enhancer e promotori, i programmi trascrizionali e le transizioni di stato cellulare. L’attività di BRD9 interseca il controllo epigenetico di proliferazione, differenziamento e risposte al danno al DNA attraverso vie di organizzazione della cromatina e regolazione trascrizionale. La disregolazione del rimodellamento della cromatina associato a BRD9 è stata collegata ad alterazioni della specificazione di linea e a dipendenze trascrizionali oncogeniche, rendendo **Brd9** un bersaglio utile per studi meccanicistici sull’organizzazione del genoma e sulla regolazione genica rilevante per il cancro.
BRD9 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Brd9 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Brd9. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Brd9. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Brd9 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.