CRISPRデータではありません：画像はCRISPR実験結果を可視化するための抗体の品質を示しています。
CRISPRデータではありません：画像はCRISPR実験結果を可視化するための抗体の品質を示しています。
bradykinin B1 R Double Nickaseプラスミド (h): sc-401169-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- bradykinin B1 R Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- bradykinin B1 Rダブルニカースプラスミド（h）およびbradykinin B1 Rダブルニカースプラスミド（h2）は、BDKRB1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: bradykinin B1 R 抗体 (F-11): sc-518136
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
bradykinin B1 R Double Nickaseプラスミド (h) | sc-401169-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
bradykinin B1 R Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-401169-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BDKRB1 は、誘導性のブラジキニンB1受容体（Gタンパク質共役受容体）をコードしており、炎症性シグナルや組織傷害によって発現が上昇します。des-Argキニンによって活性化されると、ブラジキニンB1受容体（bradykinin B1 R）は Gαq／Gαi 経路を介したシグナル伝達を促進し、細胞内カルシウム濃度の上昇や MAPK・NF-κB プログラムの活性化を引き起こして、サイトカイン産生、白血球の動員、血管反応を制御します。この受容体は炎症および侵害受容（痛み）シグナルのネットワークに関与し、慢性炎症や疼痛機序、さらに血管機能障害や代謝ストレスといった文脈でしばしば研究されています。BDKRB1 の発現やシグナル伝達の変化は、疾患に関連する炎症性微小環境と関連づけられており、ヒト細胞モデルにおける経路解析のためのメカニズム上の重要な結節点として利用されています。
bradykinin B1 R ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における BDKRB1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、BDKRB1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、BDKRB1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、BDKRB1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。