Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BMP2K Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405196
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BMP2K Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico BMP2K, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: BMP2K Antibody (E-8): sc-514681
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BMP2K Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-405196 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
BMP2K (BMP-2 inducible kinase) codifica una chinasi serina/treonina implicata nel traffico intracellulare e nella dinamica di membrana, con ruoli riportati nell’endocitosi mediata da clatrina e nella regolazione dei complessi di proteine adattatrici. La sua attività è stata collegata alla modulazione della maturazione eritroide e dei programmi di differenziamento cellulare, in linea con contesti di segnalazione responsivi a BMP. Eventi di fosforilazione associati a BMP2K possono influenzare l’internalizzazione dei recettori e l’ampiezza della segnalazione a valle, collegandola a reti più ampie che controllano proliferazione e risposte allo stress. Vie endocitiche e di differenziamento deregolate che coinvolgono BMP2K sono state esplorate in studi su fenotipi ematologici e sul riassetto della segnalazione associato al cancro.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO BMP2K (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene BMP2K in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del BMP2K insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto BMP2K a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina BMP2K.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di BMP2K per lo studio della segnalazione di BMP2K, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni BMP2K critici per la funzione di BMP2K
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di BMP2K per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal BMP2K CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal BMP2K CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus BMP2K. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal BMP2K Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR BMP2K (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia BMP2K per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio BMP2K definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.