BMP-8B Plasmide Double Nickase (h): sc-404893-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BMP-8B Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il BMP-8B Double Nickase Plasmid (h) e il BMP-8B Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira BMP8B. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: BMP-8B Antibody (AT13E6): sc-517391
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BMP-8B Plasmide Double Nickase (h) | sc-404893-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BMP-8B Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404893-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BMP8B codifica la proteina morfogenetica ossea 8B (BMP-8B), un ligando secreto appartenente alla superfamiglia TGF-β/BMP che segnala attraverso recettori di tipo I/II con attività chinasi serina/treonina, attivando programmi trascrizionali dipendenti da SMAD1/5/9. BMP-8B contribuisce alla regolazione del patterning dello sviluppo, della differenziazione tissutale e di processi associati alla matrice extracellulare, con effetti a valle sulle decisioni di destino cellulare e sulla morfogenesi. Nella fisiologia dell’adulto, l’attività della via BMP che coinvolge BMP8B è stata collegata alla regolazione del metabolismo e alla biologia del tessuto adiposo termogenico, mentre la disregolazione più ampia della segnalazione BMP è associata a fibrosi, anomalie scheletriche e fenotipi correlati al cancro. Per questo motivo, BMP8B viene spesso studiato per analizzare le dinamiche della segnalazione BMP in contesti specifici, l’utilizzo dei recettori e il crosstalk della via con le reti MAPK/PI3K nelle cellule umane.
BMP-8B Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus BMP8B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di BMP8B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di BMP8B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con BMP8B interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.