BMP-5 Plasmide Double Nickase (h): sc-404234-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BMP-5 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il BMP-5 Double Nickase Plasmid (h) e il BMP-5 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira BMP5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: BMP-5 Antibody (MM0117-9G27): sc-517459
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BMP-5 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404234-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BMP-5 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404234-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BMP5 codifica la bone morphogenetic protein 5 (BMP-5), un ligando secreto della superfamiglia TGF-β che trasduce il segnale tramite i recettori BMP di tipo I/II a serina/treonina chinasi, attivando programmi trascrizionali dipendenti da SMAD1/5/8. BMP-5 contribuisce al patterning embrionale, alla differenziazione osteocondrale e all’omeostasi della matrice extracellulare, coordinando il crosstalk con MAPK e con altri nodi di segnalazione dipendenti dal contesto. Alterazioni della segnalazione di BMP5 sono state associate a uno sviluppo scheletrico e articolare anomalo e a un rimodellamento tissutale deregolato, a sostegno della sua rilevanza negli studi sulla biologia della cartilagine, sulla formazione ossea e sulle vie di sviluppo. L’attività di BMP-5 si integra inoltre con gradienti morfogenetici più ampi che influenzano l’impegno di linea e l’architettura dei tessuti.
BMP-5 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus BMP5 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di BMP5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di BMP5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con BMP5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.