beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β₁-AR Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-400660

Panoramica

ADRB1 codifica il recettore adrenergico umano beta 1 (β1-AR), un recettore accoppiato a proteine G che si associa principalmente a Gs per stimolare l’adenilato ciclasi, aumentare i livelli di cAMP e attivare programmi di fosforilazione dipendenti da PKA. La segnalazione di β1-AR regola la cronotropia e l’inotropia cardiaca, influenza la gestione del calcio e l’apparato contrattile, e si integra con le vie MAPK/ERK e GRK–β-arrestina, che modulano la desensibilizzazione del recettore e le risposte trascrizionali a valle. Oltre che nei cardiomiociti, l’attività di ADRB1 modula la segnalazione metabolica e la risposta allo stress in molteplici tessuti attraverso l’input catecolaminergico simpatico. Varianti genetiche e funzionali di ADRB1 e una segnalazione β1-AR deregolata sono state associate a fenotipi cardiovascolari e a risposte alterate in modelli di rimodellamento cardiaco e di iperstimolazione adrenergica.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ADRB1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ADRB1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ADRB1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ADRB1 per lo studio della segnalazione di beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni ADRB1 critici per la funzione di beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ADRB1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ADRB1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ADRB1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ADRB1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.