Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
BABAM1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-409906
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BABAM1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico BABAM1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: BABAM1 Antibody (H-10): sc-398570
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BABAM1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-409906 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
BABAM1 (BABAM1) è un componente chiave del complesso BRCA1-A, che riconosce la cromatina ubiquitinata nei siti di rotture a doppio filamento del DNA e contribuisce a coordinare la risposta al danno al DNA. Attraverso interazioni con BRCA1 e fattori associati, BABAM1 sostiene la stabilità del genoma modulando la segnalazione del danno e influenzando la scelta della via di riparazione, inclusi processi legati alla regolazione della ricombinazione omologa. La sua attività è collegata al controllo dei checkpoint del ciclo cellulare e alle risposte allo stress replicativo, rendendolo rilevante per studi sul coordinamento della riparazione dipendente dalla cromatina. La deregolazione della funzione del complesso BRCA1-A è stata associata a una capacità di riparazione del DNA alterata e a fenotipi di instabilità genomica osservati in molteplici contesti tumorali.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO BABAM1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene BABAM1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del BABAM1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto BABAM1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina BABAM1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di BABAM1 per lo studio della segnalazione di BABAM1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni BABAM1 critici per la funzione di BABAM1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di BABAM1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal BABAM1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal BABAM1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus BABAM1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal BABAM1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR BABAM1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia BABAM1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio BABAM1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.