Asporin Plasmide Double Nickase (m): sc-426152-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Asporin Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Asporin Double Nickase Plasmid (m) e il Asporin Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Aspn. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Asporin Plasmide Double Nickase (m) | sc-426152-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Asporin Plasmide Double Nickase (m2) | sc-426152-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Aspn codifica l’asporina, un piccolo proteoglicano della matrice extracellulare ricco in leucina, che contribuisce alla fibrillogenesi del collagene e alla regolazione dell’organizzazione della matrice nei tessuti muscoloscheletrici. L’asporina murina può modulare la segnalazione dei fattori di crescita, incluse interazioni che influenzano le vie della famiglia del TGF-β, con effetti su condrogenesi, osteogenesi e omeostasi del tessuto fibrocartilagineo. Alterazioni dell’espressione o della funzione di ASPN sono state collegate a una rimodellazione deregolata della matrice extracellulare e a segnali infiammatori, rendendola rilevante per studi su osteoartrosi, degenerazione del disco intervertebrale, patologie di tendini/legamenti e cambiamenti della matrice associati alla fibrosi. Modelli in vitro e in vivo utilizzano spesso la perturbazione di Aspn per analizzare come i segnali della matrice stromale plasmino l’adesione cellulare, la meccanotrasduzione e i programmi di differenziamento.
Asporin Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Aspn nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Aspn. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Aspn. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Aspn interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.