ARMCX1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-407214

Panoramica

ARMCX1 (armadillo repeat containing, X-linked 1) codifica una proteina associata ai mitocondri contenente ripetizioni armadillo, implicata nel coordinare la dinamica mitocondriale, il traffico intracellulare e il controllo di qualità nelle cellule dei mammiferi. Attraverso interazioni che influenzano il trasporto mitocondriale e l’equilibrio tra fusione e fissione, ARMCX1 può modulare la bioenergetica cellulare, l’omeostasi redox e la suscettibilità all’apoptosi, collegandosi così ai programmi di risposta allo stress. Nei neuroni e in altri tipi cellulari polarizzati, i meccanismi legati ad ARMCX1 vengono spesso studiati nel contesto della distribuzione degli organelli lungo le reti del citoscheletro e del loro impatto sulla sopravvivenza cellulare. Un’alterata espressione di ARMCX1 è stata riportata in diversi dataset di oncologia e neurobiologia, stimolando ricerche meccanicistiche su come la regolazione mitocondriale dipendente da ARMCX1 contribuisca a fenotipi associati alla malattia.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ARMCX1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ARMCX1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ARMCX1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ARMCX1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ARMCX1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ARMCX1 per lo studio della segnalazione di ARMCX1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni ARMCX1 critici per la funzione di ARMCX1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ARMCX1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal ARMCX1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal ARMCX1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ARMCX1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal ARMCX1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR ARMCX1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ARMCX1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ARMCX1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.