ARID3A Plasmide Double Nickase (h): sc-404552-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ARID3A Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ARID3A Double Nickase Plasmid (h) e il ARID3A Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ARID3A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ARID3A Antibody (A-4): sc-398367
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ARID3A Plasmide Double Nickase (h) | sc-404552-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ARID3A Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404552-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARID3A (AT-rich interaction domain 3A) codifica un fattore di trascrizione legante il DNA della famiglia ARID, che riconosce elementi regolatori ricchi in AT e contribuisce a modellare il controllo dell’espressione genica dipendente dalla cromatina. Partecipa a programmi trascrizionali associati alla differenziazione di specifiche linee cellulari, con ruoli di rilievo nella differenziazione ematopoietica e dei linfociti B, nella regolazione dei geni delle immunoglobuline e nella modulazione delle vie del ciclo cellulare e dell’apoptosi. Attraverso interazioni con cofattori e con i complessi di rimodellamento della cromatina, ARID3A influenza reti trascrizionali legate alla proliferazione, alla segnalazione immunitaria e all’identità cellulare. Un’espressione o una funzione deregolate di ARID3A sono state associate ad alterazioni dello sviluppo delle cellule immunitarie e a stati trascrizionali oncogenici in contesti di tumori ematologici e solidi, rendendolo un nodo utile per studi meccanicistici del controllo trascrizionale.
ARID3A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ARID3A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ARID3A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ARID3A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ARID3A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.