Apelin CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401548

概要

APLNは、心血管の恒常性、血管新生、体液バランス、代謝シグナル伝達を制御するAPJ受容体（APLNR）の分泌性ペプチドリガンドであるアペリンをコードします。アペリンとAPJの結合は、PI3K/AKT、ERK/MAPK、AMPKなどのGPCR依存性経路を活性化し、内皮細胞の遊走、血管トーヌス、細胞のエネルギー利用を調節します。ヒト組織では、アペリン発現は低酸素や炎症性シグナルに応答し、血管リモデリングや脂肪組織生物学の文脈でしばしば研究されています。APLNシグナルの破綻は、心代謝表現型、肺および全身の血管機能障害、ならびに新生血管形成など腫瘍微小環境のプロセスと関連づけられています。

Apelin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるAPLN遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、APLN内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、APLNのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Apelinタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Apelinシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、APLN欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Apelinの機能に不可欠なAPLNエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、APLNゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Apelin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびApelin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、APLN遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Apelin HDRプラスミド（h）および Apelin HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAPLNホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAPLN標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。