APC2 Plasmide Double Nickase (h): sc-408180-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- APC2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il APC2 Double Nickase Plasmid (h) e il APC2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira APC2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
APC2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-408180-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
APC2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-408180-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
APC2 codifica la proteina adenomatous polyposis coli 2, uno scaffold citoscheletrico e di segnalazione che contribuisce alla regolazione della via Wnt/β-catenina promuovendo il turnover della β-catenina e modulando gli output trascrizionali legati al destino cellulare e alla proliferazione. APC2 partecipa anche alla dinamica dei microtubuli, alla polarizzazione neuronale e alla migrazione cellulare attraverso interazioni con proteine associate ad actina e microtubuli, supportando un’architettura tissutale coordinata. L’alterazione o la deregolazione dell’espressione dei membri della famiglia APC è associata a segnalazione Wnt disfunzionale, instabilità cromosomica e programmi di differenziamento aberranti, rendendo APC2 un bersaglio rilevante per studi meccanicistici sul controllo della via in modelli di sviluppo e di malattia.
APC2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus APC2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di APC2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di APC2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con APC2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.