ANT2 Plasmide Double Nickase (m): sc-419113-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ANT2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ANT2 Double Nickase Plasmid (m) e il ANT2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Slc25a5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ANT2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-419113-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ANT2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-419113-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Slc25a5 codifica la traslocasi mitocondriale ADP/ATP ANT2, un trasportatore chiave della membrana interna che scambia l’ADP citosolico con l’ATP della matrice per sostenere la fosforilazione ossidativa e l’equilibrio energetico cellulare. L’attività di ANT2 accoppia il pool di nucleotidi adenilici al potenziale di membrana mitocondriale, collegando il flusso metabolico a processi quali la biogenesi mitocondriale, la suscettibilità all’apoptosi e l’omeostasi delle specie reattive dell’ossigeno. Nei modelli murini, ANT2 è spesso studiata in contesti di rimodellamento metabolico, aumentata richiesta energetica proliferativa e risposte allo stress mitocondriale. La disregolazione del trasporto dei nucleotidi adenilici e della bioenergetica mitocondriale è rilevante per fenotipi neuromuscolari e cardiometabolici e per modelli più ampi di disfunzione mitocondriale.
ANT2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Slc25a5 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Slc25a5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Slc25a5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Slc25a5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.