ANT2 Plasmide Double Nickase (h): sc-400680-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ANT2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ANT2 Double Nickase Plasmid (h) e il ANT2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLC25A5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ANT2 Antibody (F-7): sc-518109
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ANT2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400680-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ANT2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400680-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC25A5 codifica il traslocatore di nucleotidi adenilici 2 (ANT2), un trasportatore mitocondriale della membrana interna per ADP/ATP che scambia l’ADP citosolico con l’ATP della matrice, accoppiando la fosforilazione ossidativa alla domanda energetica cellulare. ANT2 contribuisce al trasporto di metaboliti mitocondriali, alla regolazione del potenziale di membrana e all’integrazione dei segnali bioenergetici con le risposte allo stress, includendo collegamenti con la transizione di permeabilità e con vie correlate all’apoptosi. La sua espressione è spesso associata a stati proliferativi e a un metabolismo riprogrammato, rendendola rilevante per studi su disfunzione mitocondriale, alterazioni del metabolismo energetico e cambiamenti associati a malattie nei programmi di sopravvivenza cellulare. Lo studio di ANT2 aiuta a definire come lo scambio di nucleotidi influenzi l’omeostasi mitocondriale, l’equilibrio redox e le reti di segnalazione legate alla crescita.
ANT2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLC25A5 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLC25A5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLC25A5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLC25A5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.