Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
ANP32B Plasmide Double Nickase (h): sc-417840-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ANP32B Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ANP32B Double Nickase Plasmid (h) e il ANP32B Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ANP32B. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ANP32B Plasmide Double Nickase (h) | sc-417840-NIC | 20 µg | $410.00 |
ANP32B (membro B della famiglia delle fosfoproteine nucleari acide ricche in leucina 32) è una fosfoproteina nucleare conservata, implicata in processi associati alla cromatina, nella regolazione trascrizionale e nel controllo del ciclo cellulare. Come parte della famiglia ANP32, ANP32B contribuisce alla modulazione delle fosfatasi proteiche, alla segnalazione legata all’apoptosi e a funzioni nucleari associate all’RNA che influenzano le risposte cellulari allo stress. L’alterazione dell’attività di ANP32B è stata collegata a una capacità proliferativa modificata e a programmi di espressione genica deregolati osservati in molteplici contesti correlati al cancro. Queste caratteristiche rendono ANP32B un bersaglio utile per studiare le reti di segnalazione nucleare, la dinamica della cromatina e i determinanti delle decisioni sul destino cellulare in modelli cellulari umani.
ANP32B Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ANP32B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ANP32B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ANP32B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ANP32B interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.