Annexin VII Plasmide Double Nickase (h): sc-402823-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Annexin VII Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Annexin VII Double Nickase Plasmid (h) e il Annexin VII Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ANXA7. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Annexin VII Antibody (A-1): sc-17815
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Annexin VII Plasmide Double Nickase (h) | sc-402823-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Annexin VII Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402823-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANXA7 codifica l’annessina VII, una proteina legante i fosfolipidi Ca²⁺-dipendente che si associa alle membrane cellulari per coordinare il traffico di membrana, l’esocitosi e la riparazione di membrana. L’annessina VII contribuisce alla dinamica di fusione delle vescicole regolata dal Ca²⁺ ed è stata collegata al rimodellamento del citoscheletro e a eventi di trasduzione del segnale che dipendono dall’organizzazione dei microdomini lipidici. Attraverso i suoi ruoli a livello di endomembrane e della membrana plasmatica, ANXA7 può influenzare le risposte allo stress e l’omeostasi cellulare. Un’espressione o una regolazione alterata di ANXA7 è stata riportata in contesti che includono la biologia del cancro e la ricerca sulle malattie neurologiche, sostenendo l’interesse a indagarne la funzione in proliferazione, migrazione e vie di secrezione Ca²⁺-dipendenti.
Annexin VII Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ANXA7 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ANXA7. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ANXA7. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ANXA7 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.