Plasmide Double Nickase (h) Angptl4: sc-401369-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Angptl4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Angptl4 Double Nickase (h) et le plasmide Angptl4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ANGPTL4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Angptl4 Antibody (A-2): sc-373761
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Angptl4 | sc-401369-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Angptl4 | sc-401369-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANGPTL4 (angiopoïétine-like 4) code une glycoprotéine sécrétée qui module le métabolisme des lipides et de l’énergie en inhibant la lipoprotéine lipase et en modifiant la clairance des lipoprotéines riches en triglycérides. Angptl4 est régulé au niveau transcriptionnel par la signalisation PPAR et relie la disponibilité en nutriments à l’adaptation métabolique, en influençant la lipolyse du tissu adipeux, la gestion hépatique des lipides et la sensibilité systémique à l’insuline. Au-delà du métabolisme, Angptl4 participe au remodelage de l’endothélium et de la matrice extracellulaire, affectant la perméabilité vasculaire, l’inflammation et les interactions cellule–matrice. Une expression dérégulée d’ANGPTL4 a été associée à des phénotypes cardiométaboliques, à des états inflammatoires et à des programmes du microenvironnement tumoral, notamment des voies liées à l’hypoxie et aux métastases, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques.
Angptl4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ANGPTL4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ANGPTL4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ANGPTL4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ANGPTL4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.