Plasmide Double Nickase (h) Angiopoietin 2/Ang-2/ANGPT2: sc-400477-NIC

ANGPT2 code l'angiopoïétine‑2 (Ang‑2), un ligand sécrété du récepteur endothélial à activité tyrosine kinase TEK/TIE2, qui module le remodelage vasculaire, l'activation endothéliale et la perméabilité. Contrairement à la stabilisation médiée par ANGPT1, Ang‑2 agit souvent comme un antagoniste contextuel de la signalisation TIE2, sensibilisant l'endothélium aux cytokines inflammatoires et aux signaux angiogéniques pilotés par le VEGF. ANGPT2 s'intègre à des programmes liés aux voies PI3K–AKT, MAPK et NF‑κB pour influencer le bourgeonnement vasculaire, la dynamique des jonctions et le trafic des leucocytes. Une expression dérégulée d'ANGPT2 est fréquemment associée à l'angiogenèse pathologique et à l'inflammation vasculaire observées dans les tumeurs, les rétinopathies, ainsi que dans des troubles cardiométaboliques et inflammatoires, ce qui en fait un nœud mécanistique pertinent pour la recherche en biologie vasculaire.

Angiopoietin 2/Ang-2/ANGPT2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ANGPT2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ANGPT2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ANGPT2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ANGPT2.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.