Angiopoietin 2/Ang-2/ANGPT2 Plasmide Double Nickase (h): sc-400477-NIC

ANGPT2 codifica l'angiopoietina-2 (Ang-2), un ligando secreto per il recettore tirosin-chinasico endoteliale TEK/TIE2 che modula il rimodellamento vascolare, l'attivazione endoteliale e la permeabilità. A differenza della stabilizzazione mediata da ANGPT1, Ang-2 spesso agisce come antagonista dipendente dal contesto della segnalazione di TIE2, sensibilizzando l'endotelio alle citochine infiammatorie e ai segnali angiogenici guidati da VEGF. ANGPT2 si integra con i programmi PI3K–AKT, MAPK e NF-κB per influenzare la gemmazione vascolare, la dinamica delle giunzioni e il traffico leucocitario. Un'espressione deregolata di ANGPT2 è frequentemente associata all'angiogenesi patologica e all'infiammazione vascolare osservate in tumori, retinopatie e disturbi cardiometabolici e infiammatori, a supporto del suo impiego come nodo meccanicistico nella ricerca di biologia vascolare.

Angiopoietin 2/Ang-2/ANGPT2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ANGPT2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ANGPT2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ANGPT2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ANGPT2 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.