ALX3 Plasmide Double Nickase (h): sc-410682-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ALX3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ALX3 Double Nickase Plasmid (h) e il ALX3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ALX3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ALX3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-410682-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ALX3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-410682-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ALX3 codifica un fattore di trascrizione homeobox che regola programmi di espressione genica specifici di linea durante lo sviluppo cranio-facciale e degli arti, legandosi al DNA tramite il suo homeodominio di tipo paired. Nel nucleo, ALX3 integra segnali di sviluppo per controllare reti trascrizionali che governano la differenziazione mesenchimale, la definizione dei pattern e la morfogenesi. Un’attività di ALX3 deregolata o varianti con perdita di funzione sono state associate a malformazioni craniofacciali congenite e a sindromi dello sviluppo, rendendolo un nodo utile per analizzare i circuiti di regolazione genica nella biologia dello sviluppo umano. ALX3 è quindi spesso studiato nel contesto del controllo trascrizionale, della regolazione guidata da enhancer e della specificazione del destino cellulare in modelli cellulari pertinenti.
ALX3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ALX3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ALX3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ALX3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ALX3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.