ALOXE3 Plasmide Double Nickase (h): sc-408487-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ALOXE3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ALOXE3 Double Nickase Plasmid (h) e il ALOXE3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ALOXE3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ALOXE3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-408487-NIC | 20 µg | $410.00 |
ALOXE3 codifica per la lipossigenasi 3 dell’arachidonato, un enzima arricchito nell’epidermide che partecipa al metabolismo ossidativo degli acidi grassi polinsaturi e contribuisce alla produzione di mediatori lipidici coinvolti nella differenziazione dei cheratinociti. Nel programma di formazione della barriera cutanea, ALOXE3 agisce insieme ad altre lipossigenasi per sostenere i processi di cornificazione e la formazione dello strato corneo, influenzando l’organizzazione dei lipidi epidermici e il controllo della permeabilità. L’alterazione dell’attività di ALOXE3 è associata a fenotipi di ittiosi congenita, a riflesso di una barriera compromessa e di un processamento lipidico alterato. Di conseguenza, ALOXE3 è spesso studiato nei pathway che collegano l’ossidazione degli acidi grassi, la differenziazione epidermica e la segnalazione infiammatoria nei modelli di malattia dermatologica.
ALOXE3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ALOXE3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ALOXE3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ALOXE3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ALOXE3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.