Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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AdipoR1 Plasmide Double Nickase (h): sc-400995-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- AdipoR1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il AdipoR1 Double Nickase Plasmid (h) e il AdipoR1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ADIPOR1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: AdipoR1 Antibody (D-9): sc-518030
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
AdipoR1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400995-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AdipoR1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400995-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADIPOR1 codifica il recettore 1 dell'adiponectina (AdipoR1), un recettore a sette domini transmembrana che media la segnalazione dell'adiponectina per regolare l'omeostasi energetica cellulare. L'attivazione di AdipoR1 promuove vie dipendenti dalla protein chinasi attivata da AMP (AMPK) e da PPARα, influenzando l'ossidazione degli acidi grassi, l'assorbimento del glucosio, la funzione mitocondriale e le risposte allo stress cellulare. Nei tessuti umani, ADIPOR1 è ampiamente espresso e contribuisce all'adattamento metabolico nel muscolo e in altre cellule ad elevata richiesta energetica. La disregolazione della segnalazione di ADIPOR1 è stata associata a insulino-resistenza, disfunzione metabolica legata all'obesità e alterazioni della segnalazione infiammatoria, rendendolo un bersaglio utile per studi meccanicistici sulle vie della malattia metabolica.
AdipoR1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ADIPOR1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ADIPOR1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ADIPOR1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ADIPOR1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.