ADH7 Plasmide Double Nickase (h): sc-405066-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ADH7 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ADH7 Double Nickase Plasmid (h) e il ADH7 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ADH7. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ADH7 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405066-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ADH7 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405066-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADH7 codifica l’alcol deidrogenasi 7 (classe IV), un’ossidoreduttasi citosolica NAD(P)+-dipendente che catalizza l’ossidazione dell’etanolo e di diversi alcoli derivati da retinoidi e lipidi, contribuendo alla generazione di aldeidi e al metabolismo a valle. È espressa in modo marcato negli epiteli del tratto gastrointestinale superiore, dove interagisce con l’omeostasi dei retinoidi, l’equilibrio redox e la detossificazione delle specie carboniliche reattive. Grazie al suo ruolo nel metabolismo di etanolo/retinolo e nella gestione delle aldeidi, ADH7 è rilevante per vie che influenzano la differenziazione epiteliale, le risposte allo stress ossidativo e la biologia della barriera. Alterazioni dell’attività o dell’espressione di ADH7 sono state studiate nel contesto delle differenze interindividuali nel carico di aldeidi associate all’alcol e della suscettibilità al danno epiteliale e alla carcinogenesi.
ADH7 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ADH7 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ADH7. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ADH7. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ADH7 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.