Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 Plasmide Double Nickase (h): sc-401251-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 Double Nickase Plasmid (h) e il Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ADCY6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401251-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401251-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’ADCY6 umano codifica l’adenilato ciclasi 6 (AC6), un enzima associato alla membrana che converte l’ATP in cAMP a valle dei recettori accoppiati a proteine G, integrando segnali provenienti dalle vie accoppiate a Gαs e Gαi. Il cAMP prodotto da AC6 regola la segnalazione mediata da PKA ed EPAC, modellando reti di fosforilazione che influenzano il trasporto ionico, la contrattilità, il controllo metabolico e programmi trascrizionali dipendenti dallo stimolo, come quelli mediati da CREB. In quanto effettore chiave della produzione di secondi messaggeri indotta dai recettori, ADCY6 è spesso studiato in contesti di deregolazione della segnalazione GPCR e di alterata omeostasi del cAMP, inclusi ambiti di biologia cardiovascolare e delle vie aeree, oltre a fenotipi endocrini e metabolici. La sua attività compartimentalizzata alla membrana plasmatica lo rende utile per lo studio dei microdomini di segnalazione e del cross-talk con le vie del calcio e delle fosfodiesterasi.
Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ADCY6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ADCY6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ADCY6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ADCY6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.