Adenosine A2A-R Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400807-LAC

ADORA2A codifica o receptor humano de adenosina A2A (A2A-R), um receptor acoplado à proteína G que sinaliza principalmente via Gs para elevar o cAMP e ativar programas transcricionais dependentes de PKA e CREB. O A2A-R integra sinais extracelulares de adenosina com circuitos neuromodulatórios e imunorregulatórios, moldando processos como a liberação de neurotransmissores, a plasticidade sináptica e a produção de mediadores inflamatórios. A atividade do receptor cruza-se com a sinalização MAPK/ERK, a homeostase do cálcio e a regulação de redes de citocinas, ligando a expressão de ADORA2A a respostas ao estresse e a alterações no microambiente tecidual. A sinalização desregulada de ADORA2A tem sido estudada em contextos como neuroinflamação, neurodegeneração e imunossupressão associada a tumores, o que a torna relevante para mapeamento de vias e validação mecanística de alvos em modelos celulares humanos.

As Partículas de Ativação Lentivirais Adenosine A2A-R (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de ADORA2A numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Adenosine A2A-R (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição ADORA2A, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Adenosine A2A-R. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo ADORA2A e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.