Plasmide Double Nickase (h) ACBP: sc-402557-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ACBP correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ACBP Double Nickase (h) et le plasmide ACBP Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DBI. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ACBP Antibody (C-9): sc-376853
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ACBP | sc-402557-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ACBP | sc-402557-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **DBI** code la **protéine de liaison aux acyl-CoA (ACBP)**, une petite chaperonne lipidique cytosolique qui se lie aux esters d’acyl-CoA à longue chaîne et en tamponne la disponibilité pour la synthèse des lipides, la **β‑oxydation** et le remodelage membranaire. En régulant le trafic des acyl-CoA, l’ACBP influence l’homéostasie métabolique, les réponses au stress du RE (réticulum endoplasmique) et le couplage entre le métabolisme lipidique et des voies de signalisation qui façonnent l’équilibre énergétique cellulaire. L’activité de DBI/ACBP a été étudiée dans des contextes de dérégulation métabolique, de biologie des gouttelettes lipidiques et de programmes d’adaptation au stress, fréquemment altérés dans des modèles de cancer et de maladies neurodégénératives. En tant que transporteur multifonctionnel d’acyl-CoA, l’ACBP constitue un point d’entrée exploitable pour disséquer la manière dont la disponibilité lipidique reprogramme des phénotypes transcriptionnels et à l’échelle des organites.
ACBP Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DBI dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DBI. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DBI. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DBI.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.