ABTB1 Plasmide Double Nickase (h): sc-408539-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ABTB1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ABTB1 Double Nickase Plasmid (h) e il ABTB1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ABTB1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ABTB1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-408539-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ABTB1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-408539-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABTB1 (ankyrin repeat and BTB/POZ domain containing 1) codifica una proteina citosolica di tipo adattatore, caratterizzata da domini BTB/POZ e da motivi a ripetizione di ankyrina che favoriscono le interazioni proteina-proteina e l’assemblaggio di complessi multiproteici. ABTB1 è stata associata alla regolazione dei programmi di proliferazione e differenziamento cellulare, con collegamenti riportati al controllo di qualità dipendente dall’ubiquitina e all’organizzazione del citoscheletro. Attraverso queste reti di interazione, ABTB1 viene studiata in vie che influenzano la progressione del ciclo cellulare, le risposte allo stress e il mantenimento dell’omeostasi tissutale. Un’alterata espressione di ABTB1 è stata osservata in molteplici dataset correlati al cancro, rendendola un bersaglio utile per studi meccanicistici della segnalazione associata ai tumori e della fitness cellulare.
ABTB1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ABTB1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ABTB1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ABTB1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ABTB1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.