A1BG Plasmide Double Nickase (h): sc-403087-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- A1BG Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il A1BG Double Nickase Plasmid (h) e il A1BG Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira A1BG. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: A1BG Antibody (F-9): sc-374415
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
A1BG Plasmide Double Nickase (h) | sc-403087-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
A1BG Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403087-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La glicoproteina alfa-1B (A1BG) codifica una glicoproteina plasmatica secreta appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline, prodotta principalmente dal fegato e rilevabile nel circolo sanguigno e nei fluidi extracellulari. Sebbene la sua funzione molecolare precisa non sia ancora stata definita completamente, A1BG viene spesso studiata nel contesto delle reti di interazione tra proteine extracellulari, del turnover delle glicoproteine e di stati infiammatori e metabolici sistemici che influenzano il proteoma plasmatico. Variazioni nell’abbondanza di A1BG sono state riportate in molteplici profili proteomici associati a patologie, a supporto del suo impiego come bersaglio collegato a biomarcatori nei flussi di lavoro di scoperta traslazionale. In modelli cellulari e tissutali, l’analisi di A1BG può aiutare a collegare la dinamica delle proteine secrete a vie che regolano la risposta dell’ospite, il rimodellamento tissutale e la segnalazione del microambiente.
A1BG Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus A1BG nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di A1BG. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di A1BG. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con A1BG interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.