β-defensin 131 Plasmide Double Nickase (h): sc-416882-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- β-defensin 131 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il β-defensin 131 Double Nickase Plasmid (h) e il β-defensin 131 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DEFB131. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
β-defensin 131 Plasmide Double Nickase (h) | sc-416882-NIC | 20 µg | $410.00 |
DEFB131 codifica la β-defensina 131 umana, un piccolo peptide antimicrobico cationico che contribuisce all’immunità innata delle mucose disruptando direttamente le membrane microbiche e modulando la segnalazione infiammatoria dell’ospite. In quanto membro della famiglia delle defensine, la β-defensina 131 è associata alla funzione di barriera dell’epitelio e a segnali chemiotattici che influenzano il reclutamento e l’attivazione delle cellule immunitarie, intersecandosi con vie che regolano le interazioni ospite–microbo e le risposte citochiniche locali. Alterazioni nei pattern di espressione delle defensine sono state studiate nel contesto della suscettibilità alle infezioni e dell’infiammazione disregolata nei tessuti di barriera, rendendo DEFB131 rilevante per studi sull’omeostasi mucosale e la regolazione immunitaria.
β-defensin 131 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DEFB131 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DEFB131. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DEFB131. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DEFB131 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.