ZDHHC9 Plasmide Double Nickase (m): sc-431594-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ZDHHC9 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ZDHHC9 Double Nickase Plasmid (m) e il ZDHHC9 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Zdhhc9. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ZDHHC9 Plasmide Double Nickase (m) | sc-431594-NIC | 20 µg | $410.00 |
Zdhhc9 codifica ZDHHC9, una palmitoiltransferasi della famiglia DHHC che catalizza la S‑palmitoilazione dei substrati proteici per regolare l’associazione alla membrana, il traffico intracellulare e la compartimentalizzazione dei segnali. Modulando la localizzazione, dipendente dalla lipidazione, delle proteine di segnalazione, ZDHHC9 contribuisce a vie che controllano la dinamica delle vescicole e la comunicazione cellulare, con effetti a valle sui programmi di crescita e differenziamento. Nei sistemi murini, alterazioni della palmitoilazione mediata da DHHC sono state collegate a fenotipi di neurosviluppo e a reti di segnalazione deregolate, rendendo Zdhhc9 un nodo utile per studiare come la lipidazione post‑traduzionale plasmi la funzione cellulare. La sua attività viene spesso analizzata insieme ad altri componenti della macchina della palmitoilazione e dell’organizzazione dei microdomini di membrana, per collegare la modifica dei substrati all’output delle vie di segnalazione.
ZDHHC9 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Zdhhc9 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Zdhhc9. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Zdhhc9. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Zdhhc9 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.