Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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XPA Plasmide Double Nickase (h): sc-401483-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- XPA Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il XPA Double Nickase Plasmid (h) e il XPA Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira XPA. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: XPA Antibody (B-1): sc-28353
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
XPA Plasmide Double Nickase (h) | sc-401483-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
XPA Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401483-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
XPA (xeroderma pigmentosum gruppo A) codifica un fattore centrale di riconoscimento e verifica del danno al DNA nella riparazione per escissione di nucleotidi (NER), dove stabilizza gli intermedi di riparazione e coordina il reclutamento delle endonucleasi e della proteina di replicazione A nei siti di lesioni voluminose che deformano l’elica. La proteina XPA è fondamentale per rimuovere i fotoprodotti indotti dai raggi UV e gli addotti chimici, preservando così l’integrità del genoma e limitando la mutagenesi durante replicazione e trascrizione. L’alterazione della funzione di XPA è associata al disordine da difetto di riparazione del DNA xeroderma pigmentosum e lo stato di XPA è ampiamente utilizzato per valutare la capacità della NER, le risposte allo stress replicativo e il crosstalk della segnalazione del danno al DNA.
XPA Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus XPA nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di XPA. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di XPA. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con XPA interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.