Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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UFD1 Plasmide Double Nickase (h): sc-403304-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- UFD1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il UFD1 Double Nickase Plasmid (h) e il UFD1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira UFD1L. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: UFD1 Antibody (B-7): sc-377265
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
UFD1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403304-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UFD1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403304-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UFD1L codifica UFD1, un componente centrale del complesso UFD1–NPL4 che coopera con l’ATPasi AAA+ p97/VCP per estrarre substrati poliubiquitinati da membrane e da assemblaggi macromolecolari, indirizzandoli alla degradazione proteasomiale. Questo asse è fondamentale per la degradazione associata al reticolo endoplasmatico (ERAD), per il controllo qualità delle proteine e per il turnover dipendente dall’ubiquitina durante la progressione del ciclo cellulare e le risposte al danno al DNA. Regolando l’eliminazione di complessi proteici mal ripiegati o bloccati, UFD1 поддержa la proteostasi e le vie di adattamento allo stress che influenzano la vitalità nelle cellule a rapida proliferazione. Un’alterata regolazione della via p97/VCP–UFD1/NPL4 è stata collegata a squilibri della proteostasi e a difetti nel mantenimento del genoma, rilevanti per studi sulla neurodegenerazione e su fenotipi cellulari associati al cancro.
UFD1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus UFD1L nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di UFD1L. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di UFD1L. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con UFD1L interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.