TFIIIC90 Plasmide Double Nickase (h): sc-411269-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TFIIIC90 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TFIIIC90 Double Nickase Plasmid (h) e il TFIIIC90 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GTF3C4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TFIIIC90 Plasmide Double Nickase (h) | sc-411269-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TFIIIC90 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411269-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **GTF3C4** codifica **TFIIIC90**, una subunità centrale del complesso **TFIIIC** che riconosce elementi promotori interni all’interno dei geni trascritti dalla **RNA polimerasi III**, inclusi i tRNA e altri piccoli RNA non codificanti. Favorendo l’assemblaggio del macchinario di pre-inizio della Pol III e influenzando l’organizzazione della cromatina nei loci della Pol III, TFIIIC90 contribuisce all’omeostasi dei piccoli RNA, alla capacità traduttiva e a un coordinamento più ampio delle reti trascrizionali. La regolazione dipendente da TFIIIC si interseca con il controllo della crescita cellulare, le risposte allo stress e l’architettura del genoma attraverso i suoi ruoli su elementi ripetitivi e funzioni tipo barriera/isolatore in specifici contesti genomici. La deregolazione dei programmi trascrizionali della Pol III e dei componenti di TFIIIC è stata associata a fenotipi proliferativi e ad alterazioni del metabolismo dell’RNA, rendendo TFIIIC90 un bersaglio utile per studi meccanicistici in vie rilevanti per il cancro e per la ribostasi.
TFIIIC90 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GTF3C4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GTF3C4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GTF3C4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GTF3C4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.