T2R38 Plasmide Double Nickase (m): sc-436483-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- T2R38 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il T2R38 Double Nickase Plasmid (m) e il T2R38 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Tas2r138. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
T2R38 Plasmide Double Nickase (m) | sc-436483-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
T2R38 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-436483-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Tas2r138** codifica il recettore del gusto amaro **T2R38**, un GPCR che rileva ligandi amari correlati alle tiouree e si accoppia alla segnalazione mediata da proteine G per modulare la dinamica del Ca²⁺ intracellulare e le vie a valle dei secondi messaggeri. Oltre alla percezione gustativa, i recettori della famiglia T2R sono espressi in tessuti extraorali, dove possono influenzare risposte chemosensoriali e programmi di segnalazione cellulare legati alla funzione epiteliale e immunitaria. Le varianti di **Tas2r138** e le alterazioni della segnalazione recettoriale sono spesso studiate nel contesto della biologia sensoriale e della chemorecezione, con una rilevanza più ampia per i meccanismi attraverso cui la segnalazione dei GPCR modella le risposte a livello tissutale. In quanto locus che codifica un recettore facilmente manipolabile, **Tas2r138** consente studi mirati sulle vie di attivazione dei GPCR, sulla trasduzione del segnale e sugli adattamenti trascrizionali dipendenti dal recettore.
T2R38 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Tas2r138 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Tas2r138. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Tas2r138. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Tas2r138 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.