Sox10 Plasmide Double Nickase (m): sc-423078-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Sox10 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Sox10 Double Nickase Plasmid (m) e il Sox10 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Sox10. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Sox10 Antibody (A-2): sc-365692
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Sox10 Plasmide Double Nickase (m) | sc-423078-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Sox10 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-423078-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Sox10 codifica un fattore di trascrizione con dominio HMG-box che controlla la specificazione della linea della cresta neurale e la differenziazione e il mantenimento della glia mielinizzante, incluse le cellule di Schwann e gli oligodendrociti. Sox10 coordina programmi trascrizionali con partner quali PAX3 e SOX9 per regolare geni coinvolti nella formazione della mielina, nello sviluppo dei nervi periferici e nella biologia dei melanociti. Attraverso queste reti, Sox10 influenza processi che vanno dall’impegno del destino cellulare alla migrazione e alla maturazione, e la sua disregolazione è associata a neurocristopatie congenite e a difetti della pigmentazione o del sistema nervoso enterico. In biologia del cancro, l’alterata espressione genica dipendente da SOX10 è ampiamente utilizzata per studiare lo stato di linea del melanoma, i programmi di invasione e la plasticità trascrizionale in sistemi modello pertinenti.
Sox10 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Sox10 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Sox10. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Sox10. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Sox10 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.