Plasmide Double Nickase (h) SMC2: sc-411488-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SMC2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SMC2 Double Nickase (h) et le plasmide SMC2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SMC2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SMC2 | sc-411488-NIC | 20 µg | $410.00 |
SMC2 code une protéine essentielle de la maintenance structurale des chromosomes, qui constitue l’armature ATPase des complexes de condensine, lesquels assurent la condensation et l’organisation des chromosomes pendant la mitose et la méiose. En régulant l’architecture de la chromatine à un niveau supérieur, SMC2 favorise une résolution et une ségrégation fidèles des chromatides sœurs ainsi que la stabilité du génome, reliant ainsi son activité à la progression du cycle cellulaire et aux réponses aux dommages de l’ADN. La compaction de la chromatine dépendante de la condensine interagit avec le stress de réplication et les voies de réparation, et une altération de la fonction de la condensine peut favoriser l’instabilité chromosomique et l’aneuploïdie. Une dérégulation de l’expression ou de la fonction de SMC2 a été observée dans des contextes de maladies prolifératives, ce qui en fait un point d’entrée utile pour étudier la fidélité mitotique et les mécanismes de maintenance du génome dans les cellules humaines.
SMC2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SMC2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SMC2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SMC2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SMC2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.