SMC2 Plasmide Double Nickase (h): sc-411488-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SMC2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SMC2 Double Nickase Plasmid (h) e il SMC2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SMC2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SMC2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-411488-NIC | 20 µg | $410.00 |
SMC2 codifica una proteina fondamentale del mantenimento strutturale dei cromosomi che costituisce l’impalcatura ATPasica dei complessi condensina, responsabili della condensazione e dell’organizzazione dei cromosomi durante mitosi e meiosi. Regolando l’architettura della cromatina di ordine superiore, SMC2 sostiene la corretta risoluzione e segregazione delle cromatidi sorelle e la stabilità del genoma, collegando la sua attività alla progressione del ciclo cellulare e alle risposte al danno del DNA. La compattazione della cromatina dipendente dalla condensina si interseca con lo stress replicativo e con le vie di riparazione, nelle quali un’alterata funzione della condensina può favorire instabilità cromosomica e aneuploidia. Una deregolazione dell’espressione o della funzione di SMC2 è stata osservata in contesti di malattie proliferative, rendendola un nodo utile per studiare la fedeltà mitotica e i meccanismi di mantenimento del genoma nelle cellule umane.
SMC2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SMC2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SMC2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SMC2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SMC2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.