SLC25A36 Plasmide Double Nickase (m): sc-431417-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SLC25A36 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SLC25A36 Double Nickase Plasmid (m) e il SLC25A36 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Slc25a36. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SLC25A36 Plasmide Double Nickase (m) | sc-431417-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLC25A36 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-431417-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Slc25a36 codifica SLC25A36, un trasportatore di soluti della membrana interna mitocondriale implicato nel mantenimento dell’omeostasi dei nucleotidi, poiché media il trasporto di nucleotidi pirimidinici e di metaboliti correlati attraverso la membrana mitocondriale. Regolando i pool intramitocondriali di nucleotidi, SLC25A36 supporta la replicazione e la riparazione del DNA mitocondriale, la capacità di fosforilazione ossidativa e, più in generale, il flusso metabolico mitocondriale. Alterazioni del trasporto mitocondriale dei nucleotidi possono compromettere la bioenergetica e le risposte allo stress, processi collegati a fenotipi neuroevolutivi e neuromuscolari e ad altri disturbi associati alla disfunzione mitocondriale. Nei sistemi murini, Slc25a36 rappresenta un bersaglio sperimentale maneggevole per studiare come il trasporto dei nucleotidi si intersechi con il mantenimento del genoma mitocondriale, l’equilibrio redox e le transizioni dello stato cellulare.
SLC25A36 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Slc25a36 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Slc25a36. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Slc25a36. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Slc25a36 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.