Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Six2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-422957
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Six2 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Six2, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Six2 Antibody (H-4): sc-377193
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Six2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-422957 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Six2 (SIX homeobox 2) è un fattore di trascrizione con dominio omeobox che regola le decisioni sul destino cellulare durante lo sviluppo embrionale, con ruoli di primo piano nell’organogenesi renale e nel mantenimento delle popolazioni di progenitori del nefrone. Agisce all’interno di reti trascrizionali che interagiscono con la segnalazione WNT/β-catenina, FGF e BMP per bilanciare l’autorinnovamento dei progenitori e la differenziazione. Nei modelli murini, un’alterazione dell’attività di Six2 compromette la nefrogenesi e può portare ad anomalie congenite del rene e delle vie urinarie, rendendolo un gene chiave per lo studio delle vie di sviluppo. Six2 è inoltre utilizzato come marcatore e regolatore in studi di lineage tracing e di differenziazione di progenitori renali e mesenchimali.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Six2 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Six2 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Six2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Six2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Six2.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Six2 per lo studio della segnalazione di Six2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Six2 critici per la funzione di Six2
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Six2 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Six2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Six2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Six2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Six2 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Six2 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Six2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Six2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.