SCGF Plasmide Double Nickase (h): sc-411000-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SCGF Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SCGF Double Nickase Plasmid (h) e il SCGF Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CLEC11A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SCGF Plasmide Double Nickase (h) | sc-411000-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SCGF Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411000-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CLEC11A codifica per lo stem cell growth factor (SCGF), una citochina secreta della famiglia delle lectine di tipo C, implicata nel mantenimento delle cellule staminali e progenitrici ematopoietiche e nella segnalazione della nicchia stromale–ematopoietica. SCGF sostiene programmi di proliferazione e sopravvivenza dei progenitori ed è comunemente studiato nel contesto della differenziazione regolata da citochine, del crosstalk della segnalazione infiammatoria e della biologia del microambiente del midollo osseo. Un’espressione alterata di CLEC11A/SCGF è stata associata a un’ematopoiesi disregolata e a interazioni tumore–stroma, rendendolo rilevante per la ricerca sul bias della linea mieloide, sui fenotipi di insufficienza midollare e sul rimodellamento del microambiente associato al cancro. Queste caratteristiche rendono CLEC11A un bersaglio utile per analizzare i segnali extracellulari che influenzano le decisioni di destino delle cellule staminali e lo sviluppo delle cellule immunitarie.
SCGF Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CLEC11A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CLEC11A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CLEC11A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CLEC11A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.